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Fases experimentales con vanadio y aplicación a las proteínas de membrana de unión a nucleótidos

Título Fases experimentales con vanadio y aplicación a las proteínas de membrana de unión a nucleótidos
Autores Kamel El Omari, Nada Mohamad, Kiran Bountra, Ramona Duman, Maria Romano, Katja Schlegel, Hok-Sau Kwong, Vitaliy Mykhaylyk, Claus Olesen, Jesper Vuust Moller, Maike Bublitz, Konstantinos Beis, Armin Wagner
Revista IUCrJ
Fecha 10/14/2020
DOI 10.1107/S2052252520012312
Introducción La determinación de la estructura de proteínas tanto solubles como de membrana suele complicarse por el problema de la fase cristalográfica, especialmente si no se dispone de una estructura homóloga similar. Aunque se prefiere la obtención de fases experimentales para nuevas estructuras, tradicionalmente exige la derivatización de átomos pesados, lo que supone un reto y requiere mucho tiempo. En este artículo se presenta un método nuevo y rápido para la obtención de fases experimentales para la determinación de la estructura de proteínas mediante el fasedado con vanadio. El vanadato, un estado de transición análogo de las reacciones de transferencia de fosforilo, se une específicamente al sitio activo de muchas enzimas implicadas en este proceso. La eficacia de la técnica se confirmó determinando las estructuras de tres complejos proteína-vanadio, entre ellos dos proteínas integrales de membrana: la Ca2+-ATPasa del retículo sarcoplásmico de conejo, el transportador de casetes de unión ATP McjD de Escherichia coli y la enzima soluble ARNasa A de Bos taurus. Este método tuvo éxito incluso a baja resolución y a pesar de la significativa anisotropía de los datos. Aplicable a numerosas proteínas de seis de las siete clases de la Comisión de Enzimas, depende únicamente de la química específica de la proteína y no requiere modificaciones, lo que mejora el conjunto de herramientas de desfase. Más allá de sus capacidades de desfase, los complejos proteína-vanadio proporcionan información detallada sobre los mecanismos de reacción de las proteínas estudiadas.
Cita Kamel El Omari, Nada Mohamad y Kiran Bountra et al. Experimental phasing with vanadium and application to nucleotide-binding membrane proteins. IUCrJ. 2020. DOI: 10.1107/S2052252520012312
Elemento Vanadio (V)
Materiales Compuestos químicos
Temas Materiales biomédicos
Industria Investigación y laboratorio
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